福尔马林固定石蜡包埋组织在生物医学研究中被广泛使用，但是从石蜡包埋组织中提取蛋白由于甲醛会介导
分子交联而变得异常困难，传统方法从石蜡包埋组织中提取蛋白需要使用有机溶剂重复脱蜡和水化，然后在
高温下或不可避免的超声处理后提取蛋白。这些方法虽然在某些情况下是比较有效的，但是操作繁琐，需要
消耗3-4小时。minutetm石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒提供了一种简便，快速的方法，不需有机溶剂脱蜡。
整个过程可以在不到1小时的时间内完成，蛋白产量可以高达2-3毫克/毫升。
应用：
提取的蛋白可用于sds-page，wb，elisa，免疫沉淀和蛋白质组学研究。
试剂盒组分
1. 20ml缓冲液a
2. 20ml缓冲液b
3. 20个1.5ml离心管
4. 2根塑料研磨棒
储存：
室温储存
所需附加材料
台式离心机（最大转速14000-16000rpm）
加热块或者水浴
产品重要信息
本试剂盒可用于从石蜡包埋组织中提取总蛋白，最终提取蛋白产量和蛋白种类由固定时间
和样品时间决定。长时间固定（>48小时）和固定老化的样品，预计提取的蛋白浓度会较低。
蛋白酶抑制剂推荐在buffer b转移到新的1.5ml离心管后添加（见步骤3）。蛋白浓度测定，推
荐使用表面活性剂兼容的bca试剂盒，因为提取缓冲液（buffer b）中含有1%的sds。研究
蛋白磷酸化，磷酸酶抑制剂（如罗氏）应在使用前加入buffer b中。
操作方法：
1.去除组织切片中多余的石蜡，组织切片厚度大约在10-20um，大小应在30-60平方毫米。取
4-5个组织切片放入1.5或2.0ml离心管中（实验室自备），加入1ml buffer a。
2.在90-95℃加热容块或水浴中孵育 8-10 分钟。翻转管子 2-3 次后，迅速将热的缓冲液*去
除，留下组织在管中。用吸头将组织刮到一个新的 1.5ml 离心管中（试剂盒内提供的，注意
不要试用其他离心管，可能与提供的研磨棒不匹配）。
3.翻转buffer b瓶子20-30次，使组织分离粉混匀，快速转移200ul buffer b到装有组织的管
子中（可选：将吸头剪掉2-3mm使开口变大更容易转移buffer b）。buffer b加入的量根据
组织切片的数量决定，一般每个组织切片使用50ul buffer b。
4.使用试剂盒提供的研磨棒扭转研磨组织样品大约2分钟（研磨棒是可重复使用的，用蒸馏水
清洗，用纸巾擦干即可）。盖上盖子，90-95℃加热块中或水浴加热 40 分钟-1 小时。加热后
在 14000-16000rpm 离心 10 分钟。将上清液转移到一个新的离心管中即可用于下游应用或存
储于-80℃。
关键词：台式离心机